烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)ISSR反应体系的优化及遗传多样性分析

• 作者: 伏颖 吴元华 孙剑萍 孙宏伟 苏燕妮 赵秀香 赵艳琴
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草靶斑病 立枯丝核菌 ISSR反应体系 遗传相似系数 聚类分析
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 97-102
• 页数: 6页
• 分类号: S435.72
• 字数: 4104字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2016.01.016

摘要

以烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)基因组DNA为模板,采用单因素和正交设计L16(45)相结合的方法对影响ISSR-PCR反应的主要因子进行优化,并对采自东北三省烟区的20个烟草靶斑病菌菌株进行ISSR分析,建立了适宜于病菌的ISSR分子标记的最佳反应体系,即20μL的反应体系中含有模板DNA 30ng,Mg2+浓度2.0mmol·L-1,dNTP浓度0.20 mmol·L-1,Taq酶1.0U,引物浓度0.4μmol·L-1.利用优化的反应体系从20个ISSR引物中筛选出13个多态性和重复性好的引物,对20个烟草靶斑病菌菌株进行ISSR分析,共扩增出132条带,多态条带比率为73.48％,在相似系数0.74处将其划分为3个类群,其中LTL-7、HLK-1、HBX-2、HBX-4、LFC-9、LTL-5、LTL-9和JLH-1共8个菌株被划分在IG Ⅰ中;IGⅡ中包括LTL-6、LKD-8、HLK-3、LTL-115、LTL-2、LFC-4和LTL-8共7个菌株;其余5个菌株分别为LTL-66、LTL-111、HLK-4、JLH-3和LTL-22被划分到IGⅢ中.分析结果表明ISSR遗传聚类组群与菌株的地理来源具有一定的相关性,而与菌株的致病性无明显的相关性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴元华	沈阳农业大学植物保护学院	159	2074	24.0	38.0
2	孙宏伟	黑龙江省烟草公司牡丹江烟草科学研究所	34	26	3.0	4.0
3	赵秀香	沈阳农业大学植物保护学院	85	876	18.0	25.0
4	赵艳琴	内蒙古民族大学农学院	19	77	5.0	7.0
5	苏燕妮	沈阳农业大学植物保护学院	9	18	3.0	4.0
6	孙剑萍	黑龙江省烟草公司牡丹江烟草科学研究所	13	19	2.0	4.0
7	伏颖		3	12	2.0	3.0