单增李斯特菌膜裂解相关基因缺失突变株的构建及生物学特性鉴定

• 作者: 周向阳 方春 方维焕 江玲丽 白帆 钱国英 高有领
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 医学
• 关键词: 单增李斯特菌 膜裂解相关基因 细胞毒性 生物学特性
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 779-788
• 页数: 10页
• 分类号: R378.99.4
• 字数: 6287字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.04.018

摘要

拟探明单核细胞增多性李斯特菌(单增李斯特菌)分离株M7可能的低致病力机制.利用SOE-PCR及同源重组法构建M7膜裂解相关基因hly及plcB单缺失(M7-△hly和M7-△plcB)及双缺失突变株(M7-△hly/plcB),比较它们与亲本株的生物学特性差异.结果如下:PCR及反转录PCR表明突变株构建成功.突变株M7-△hly和M7-△hly/plcB因hly缺失致其溶血活性丧失.plcB缺失突变株M7-△plcB和M7-△hly/plcB无可见溶脂活性.单缺失突变株M7-△plcB、M7-△hly与M7具有相似的细胞黏附及增殖能力(P＞0.05).MOI为1 000时,双缺失突变株M7-△hly/plcB对Caco-2细胞毒性最低(11.10％),M7-△hly次之(23.53％)(P＜0.05).空斑试验表明菌株M7和M7-△plcB仅能在无庆大霉素培养基中形成空斑.hly及plcB缺失致单增李斯特菌对免疫抑制小鼠毒力降低.单增李斯特菌M7低致病力可能与hly及plcB的高水平表达有关,致细菌对宿主细胞毒性增强而从细胞内逸出,使其不能躲避宿主免疫系统而被清除.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱国英		120	1410	19.0	33.0
2	高有领		12	38	4.0	6.0
3	方维焕	浙江大学动物预防医学研究所	103	1066	20.0	26.0
4	周向阳		38	152	7.0	9.0
5	白帆	浙江大学动物预防医学研究所	4	18	2.0	4.0
6	方春	浙江大学动物预防医学研究所	6	31	3.0	5.0
7	江玲丽		9	14	2.0	3.0