白杨素联合喜树碱促进鼻咽癌细胞CNE2凋亡作用研究

• 作者: 易资梅 李庆 李欣 梁扬盛 王凤岩 王剑宁 陈美芬 黄俊明
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 白杨素 喜树碱 凋亡 鼻咽癌细胞 CNE2细胞 Bcl-xL
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 药理与临床
• 页码范围: 2130-2136
• 分类号: R286.91
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.12.019

摘要

目的 研究白杨素联合喜树碱对鼻咽癌细胞CNE2凋亡的影响,并对其分子机制做初步探讨.方法 白杨素以不同浓度(10、20、40 μmol/L)单独/联合喜树碱(1 μg/mL)处理CNE2细胞后,于普通及荧光倒置显微镜下观察细胞形态变化,获得细胞死亡的定性资料;MTT法分析细胞活性,获得细胞死亡的定量资料;并以Western blotting方法检测凋亡标志蛋白caspase-3和PARP的变化情况及凋亡抑制蛋白Bcl-xL随时间的变化规律.结果 形态学观察发现,与对照组比较,白杨素联合喜树碱处理CNE2细胞后,细胞出现明显的死亡量增加,而单独白杨素、喜树碱和未处理的对照组则未观察到细胞的明显减少;MTT法分析的定量资料也支持这一结果,联合处理组细胞存活率随着白杨素剂量增加而下降,与未处理的对照组比较均有统计学意义(P＜0.05),而且与单独白杨素及单独喜树碱组比较均有统计学意义(P＜0.05);Hochest 33342荧光染色在联合处理组可观察到明显的核固缩细胞增加;Western blotting检测到凋亡标志蛋白caspase-3和PARP原蛋白减少、相应的活化裂解片段出现;全caspase酶抑制剂z-VAD-fmk可有效抑制联合处理引起的CNE2细胞凋亡,阻止凋亡标志蛋白caspase-3和PARP的活化降解;喜树碱引起的凋亡抑制蛋白Bcl-xL表达量增加,随联合处理时间延长而明显下调.结论 白杨素联合喜树碱具有促进CNE2细胞凋亡的能力,凋亡抑制蛋白Bcl-xL表达下调是其重要的分子机制.