大赖草6-SFT基因的克隆及其转基因烟草抗旱和抗寒性分析

• 作者: 李文旭 武军 王中华 王建伟 贺晓岚 赵继新 陈新宏 陈真真
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 6-SFT基因 干旱 寒冷 大赖草 生理指标 转基因烟草
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种?种质资源?分子遗传学
• 页码范围: 389-398
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2016.00389

摘要

果聚糖合成酶(6-SFT)在植物抵御逆境胁迫中起重要作用。利用 RACE 结合 RT-PCR 技术从大赖草(Leymus racemosus,2n=4x=28, NsNsXmXm)中克隆到6-SFT基因,其完整开放阅读框为1863 bp。该基因被命名为Lr-6-SFT (GenBank 登录号 KT387273),编码620个氨基酸,其推导氨基酸序列含有保守的果糖基转移酶结构域。氨基酸序列比对及进化树分析表明,大赖草6-SFT与华山新麦草、普通小麦、西尔斯山羊草和大麦6-SFT具有高度相似性。采用基因重组技术构建 p1300-35SN-Lr-6-SFT表达载体,利用农杆菌介导法将该载体转入烟草品种 W38中。对经过抗性筛选、PCR和RT-PCR验证的转基因植株进行抗旱和抗寒性鉴定,发现转基因植株与对照相比,抗旱和抗寒性明显增强；在逆境胁迫条件下,转基因植株的果聚糖、可溶性糖、脯氨酸含量都显著高于对照,而丙二醛的含量显著低于对照。本研究表明, Lr-6-SFT基因是典型的GH32家族成员,其表达能够提高烟草对干旱和寒冷胁迫的抗性。