大肠杆菌中核黄素的生物合成途径改造及生产

• 作者: 徐志博 林振泉 陈涛
• 来源期刊: 化学工业与工程
• 学科: 生物学
• 关键词: 核黄素 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 rib操纵子 核黄素激酶/黄素腺嘌呤二核苷酸氨酰转移酶
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 生物化工过程
• 页码范围: 85-90
• 分类号: Q815
• 语种: 中文
• DOI: 10.13353/j.issn.1004.9533.20141054

摘要

利用PCR技术从枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis 168)中扩增出3.5 kb的核黄素操纵子,将其分别连接到不同拷贝数的表达载体pSC101、p15A、pBR322,得到重组载体pSC 101-BSrib、p15A-BSrib和pBR322-BSrib,并分别转化到大肠杆菌(Escherichia coli K-12 MG1655).对含有核黄素操纵子的重组大肠杆菌进行摇瓶发酵,结果表明其核黄素合成能力随着质粒拷贝数的增加而增强.随后对E.coli K-12 MG1655 ECX3菌株的诱导剂IPTG浓度和发酵温度进行了优化.结果显示,0.1 mmol· L-IPTG和42℃为核黄素生产的最适宜条件.在此条件下,菌株ECX3在LB培养基中核黄素产量达到251.4 mg·L-1.最后,通过无痕基因操作技术,减弱了工程菌株ECX3核黄素激酶/黄素腺嘌呤二核苷酸氨酰转移酶(ribF)的表达以减少核黄素转化为FMN和FAD,摇瓶中工程菌株ECX4的核黄素产量提高到292.3 mg·L-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈涛	天津大学化工学院教育部系统生物工程重点实验室	45	397	10.0	19.0
2	徐志博	天津大学化工学院教育部系统生物工程重点实验室	1	1	1.0	1.0
3	林振泉	天津大学化工学院教育部系统生物工程重点实验室	1	1	1.0	1.0