双色荧光示踪鸡胚脊髓两侧连合纤维投射研究方法的建立

• 作者: 于亚楠 刘彦礼 张必超 徐振平 杨慈清 林俊堂
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 胚胎 脊髓 连合纤维 投射 活体电转 DiI示踪 鸡
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 284-288
• 分类号: Q954.48
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.02.024

摘要

目的 建立1种双色荧光示踪鸡胚脊髓两侧连合纤维投射的实验方法.方法 鸡胚孵育至胚龄2.5～3d,通过鸡胚活体原位电转基因技术将携带有报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的质粒(pCAGGS-GFP)准确注射到鸡胚脊髓腔,实现定时、定位活体电转基因.转染后继续孵育至6d,取GFP阳性表达的胚胎,部分做脊髓横向切片,部分利用open-book技术将脊髓展开观察连合纤维的发育情况,每组至少取3个标本.其后在脊髓非转染侧连合神经元所在之处,点状注射DiI乙醇溶液,封片后于4℃避光孵育3d,在荧光显微镜下观察脊髓连合纤维投射情况.结果 脊髓横切及open-book结果显示,鸡胚脊髓GFP阳性转染侧的神经元轴突穿过底板投射到脊髓对侧;同时在open-book结果中还可观察到,转染侧轴突穿过底板后分别沿腹索和外侧索向头尾部投射;DiI标记的非转染侧连合神经元轴突也同样穿过底板投射到对侧,并在侧索白质内延伸.结论 本实验成功建立了1种双色荧光示踪鸡胚脊髓两侧连合纤维投射的研究方法,为研究脊髓神经发育提供技术保障.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐振平	新乡医学院生命科学技术学院	65	215	7.0	10.0
3	杨慈清	新乡医学院生命科学技术学院	39	83	6.0	6.0
7	刘彦礼	新乡医学院生命科学技术学院	12	12	2.0	3.0
9	于亚楠	新乡医学院生命科学技术学院	4	6	2.0	2.0
12	张必超	新乡医学院生命科学技术学院	9	11	2.0	3.0