杠柳ISSR引物的筛选及PCR反应体系的优化

• 作者: 杨书祥 狄魁颖 白志军 米爽 贾艳晶 黄大庄
• 来源期刊: 林业与生态科学
• 关键词: 杠柳 ISSR PCR 体系优化
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 林业科学
• 页码范围: 140-145
• 页数: 6页
• 分类号: S793.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.hjfor.2016.0028

摘要

为建立适用于杠柳ISSR分子标记研究的扩增体系,进一步利用ISSR标记研究杠柳遗传多样性,探讨了杠柳ISSR分子标记中的各影响因素,分别对河北11个不同地区杠柳基因组DNA进行PCR扩增,在TaqMasterMix(康为世纪)基础上对影响ISSR-PCR扩增结果的模板DNA浓度、循环次数、引物退火温度进行梯度筛选.结果表明:在100条通用引物中共筛选出34条扩增条带清晰、整齐的ISSR引物;确立了适合杠柳ISSR分子标记的反应体系:总反应体积25 μL,其中Taq MasterMix(含DNA聚合酶、MgCl2、dNTPs、反应缓冲液以及稳定剂)12.5 μL,模板DNA 1 μL(70 ng/μL),正向引物和反向引物各1 μL(10μmol/L).该体系的确立为今后利用ISSR技术对杠柳种质资源的遗传多样性分析奠定了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄大庄	河北农业大学园林与旅游学院	176	1632	21.0	29.0
2	米爽	河北农业大学园林与旅游学院	5	12	2.0	3.0
3	贾艳晶	河北农业大学园林与旅游学院	3	2	1.0	1.0
4	狄魁颖	河北农业大学园林与旅游学院	2	2	1.0	1.0
5	白志军		3	11	2.0	3.0
6	杨书祥		2	2	1.0	1.0