嗜热菌β-葡萄糖苷酶A基因的克隆表达及转化大豆异黄酮糖苷

• 作者: 孙伟 王锐丽 薛业敏
• 来源期刊: 中国酿造
• 学科: 生物学
• 关键词: β-葡萄糖苷酶 酶学性质 大豆异黄酮糖苷 苷元
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 创新与借鉴
• 页码范围: 114-119
• 页数: 6页
• 分类号: Q93
• 字数: 5415字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11882/j.issn.0254-5071.2016.03.026

摘要

对嗜热厌氧乙醇菌(Thermoanaerobacter ethanolicus) JW200基因组DNA中β-葡萄糖苷酶A基因(Te-BglA)进行PCR扩增,构建重组质粒pET-20b-Te-BglA,并对纯化的重组酶Te-BglA的酶学性质和动力学参数进行研究.结果表明,基因Te-BglA在Escherichia coli细胞中成功表达,获得重组酶Te-BglA,该酶的最适温度和pH值分别为80℃和7.0.以对硝基苯酚-β-葡萄糖苷(pNPG)为底物时,Kn值为(0.78±0.02) mmol/L,Kcat/Km值为(6.86±0.16) ×104 L/(m01·s);以天然底物水杨苷为底物时,Km值为(5.18±0.10) mmol/L,Kcat/Km值为(2.04±0.02)×104 L/(mol·s),两者比较可知,重组酶Te-BglA表现出对pNPG更好的亲和力和更高的催化效率常数.该酶在80℃保温1h后相对于冰浴中(未保温)的酶活仍有70.1％的残留,在pH4.5～8.0区间仍保持较高的pH稳定性.酶解大豆粉的结果表明,重组酶Te-BglA在80℃作用3h后,大豆黄素和染料木素的产量分别达到35.9 mg/g和59.1 mg/g.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙伟	信阳农林学院生物与制药工程学院	27	72	5.0	6.0
2	王锐丽	信阳农林学院生物与制药工程学院	19	43	4.0	5.0
3	薛业敏	南京师范大学金陵女子学院	8	18	2.0	4.0