CBS基因过表达PC12细胞株的建立及鉴定

• 作者: 姜骆永 尹蔚兰 廖志强 文芳 邬力祥 阳柏成
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 生物学
• 关键词: PC12细胞 胱硫醚-β-合成酶 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2016,（26）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 17-19
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 2717字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2016.26.005

摘要

目的：建立胱硫醚-β-合成酶（CBS）基因过表达PC12细胞株并进行鉴定。方法根据GenBank数据库中的 CBS cDNA 序列设计合成 CBS 基因引物，PCR 扩增 CBS 基因，并将其克隆到慢病毒过表达载体 GV341中，用慢病毒过表达载体连同两种包装病毒载体对293T 细胞进行转染，收获含 CBS 慢病毒载体的上清液，用其感染正常的 PC12细胞，用嘌呤霉素进行筛选得到 CBS 基因过表达 PC12细胞株。用实时荧光定量 PCR 法检测所得 PC12细胞（观察组）、空载体转染的 PC12细胞（对照组）、正常 PC12细胞（空白组）中的 CBS mRNA。用 Western blot 法检测上述三组细胞中的 CBS 蛋白。结果观察组、对照组、空白组 PC12细胞 CBS mRNA 表达量分别为162．20±11．20、1．00±0．03、2．30±0．07，CBS 蛋白表达量分别为1．53±0．09、1．00±0．10、0．96±0．10。观察组 PC12细胞CBS mRNA、蛋白表达量均高于对照组和空白组（P 均＜0．05），对照组 PC12细胞 CBS mRNA、蛋白表达量与空白组相比差异均无统计学意义。结论成功构建 CBS 基因过表达 PC12细胞株。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬力祥	中南大学基础医学院	76	332	11.0	15.0
2	文芳	中南大学基础医学院	9	21	3.0	4.0
3	尹蔚兰	中南大学基础医学院	18	49	4.0	6.0
7	廖志强	南华大学医学院	2	0	0.0	0.0
8	阳柏成	南华大学医学院	1	0	0.0	0.0
9	姜骆永	南华大学医学院	1	0	0.0	0.0