来源于大肠杆菌的NMN转移酶的克隆表达与酶学性质研究

• 作者: 李红梅 段琳琳
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 大肠杆菌 NMN转移酶 克隆表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 30-35
• 页数: 6页
• 字数: 3408字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2016.02.006

摘要

在生物体内,NMN(烟酰胺单核苷酸)转移酶能够催化NMN生成NAD.本研究通过构建重组表达质粒pET30α(+)-Nmnat,成功实现来源于大肠杆菌的NMN转移酶基因(Nmnat)的原核表达.从大肠杆菌基因组中克隆得到的NMN转移酶基因长度为1 245 bp,所编码的重组酶分子量45 kDa.对重组酶的酶学性质进行分析,结果显示该酶最适反应温度和pH分别为37℃和7.5.4℃下,该酶的热失活半衰期可长达990.2 min.Mn2+、Fe2对该酶的酶活的激活作用显著,而EDTA对酶活能造成明显的抑制作用.酶动力学分析结果显示,该酶对底物NMN催化的Km和Vmax分别为16.89 mmol/L和2.46 μmol/(L·min).该NMN转移酶基因在大肠杆菌宿主中的成功表达,为NAD生物合成应用研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李红梅	上海理工大学医疗器械与食品学院	37	126	6.0	8.0
2	段琳琳	上海理工大学医疗器械与食品学院	4	15	3.0	3.0