糖基工程酵母表面呈现抗体库的构建及抗真菌β甘露糖型抗体的筛选

• 作者: 刘波 吴军 唱韶红 巩新 房泽轩
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 糖基工程酵母抗体库 免疫磁珠筛选 β甘露糖抗体 中和活性
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 326-330,370
• 页数: 6页
• 分类号: R392.1|Q78
• 字数: 4956字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2016.03.006

摘要

目的:通过构建糖基工程酵母表面呈现免疫抗体库,筛选与毕赤酵母表达的禽流感血凝素HA7结合的特异性抗体.方法:利用糖基工程毕赤酵母细胞膜锚定蛋白Sed将人IgG的Fc段锚定在酵母表面,然后用毕赤酵母表达的HA7免疫小鼠,从小鼠脾脏细胞中扩增抗体轻重链可变区基因构建抗体转化锚定了Fc的糖基工程酵母,构建表面展示免疫抗体库,通过免疫磁珠法筛选与毕赤酵母表达的HA7特异性结合的抗体表达酵母,分析筛选该抗体的特异性结合靶点.结果:构建了多态性良好的抗体表达质粒库,转化糖基工程酵母后筛选得到特异性结合HA7的抗体呈现酵母,Western印迹分析发现该抗体只与糖基化的HA7结合而不与切除糖链后的HA7结合,说明抗体结合区域在HA7的糖链上,进一步实验发现该抗体不与α甘露糖型和哺乳动物复杂型糖型结合,通过β甘露糖苷酶切研究发现抗体结合靶点为酵母表达HA7糖链上的β甘露糖.结论:利用糖基工程酵母构建抗体库,筛选得获得了抗真菌β甘露糖的抗体,动物实验发现抗体具有中和活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘波	军事医学科学院生物工程研究所	32	100	6.0	9.0
2	吴军	军事医学科学院生物工程研究所	55	227	8.0	13.0
3	巩新	军事医学科学院生物工程研究所	33	121	6.0	10.0
4	唱韶红	军事医学科学院生物工程研究所	34	141	6.0	11.0
5	房泽轩	军事医学科学院生物工程研究所	1	1	1.0	1.0