1例慢性HIV-1感染者体内CD4结合位点特异性记忆B细胞分选及抗体表达研究

• 作者: 任莉 李丹 李亚峰 梁华 洪坤学 王硕 王铮 邵一鸣 鞠斌
• 来源期刊: 中国艾滋病性病
• 学科: 医学
• 关键词: 艾滋病病毒1型 广谱中和抗体 CD4结合位点 单个B细胞分选
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 402-406
• 页数: 5页
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.13419/j.cnki.aids.2016.06.02

摘要

目的 通过抗原特异性记忆B细胞(Memory B)分选、抗体基因克隆表达和鉴定方法,从艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者中获得HIV-1中和抗体,并进一步探讨获得抗体的特征.方法 通过检测血浆中和抗体活性和表位筛选,挑选出1例含有CD4结合位点(CD4bs)特异性抗体的慢性HIV-1感染者.采用一对含有/缺失CD4-bs的探针RSC3/ΔRSC3进行Memory B分选,获得抗体可变区基因后进行抗体的表达纯化,并检验所得抗体的结合能力和中和能力.结果 从9×106外周血单核淋巴细胞(PBMCs)中分离得6个特异性Memory B.通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增出3对重链和轻链可变区基因,配对得到3个抗体,其中有一个抗体具有HIV-1CD4bs结合能力.中和实验表明,这个抗体能中和毒株SF162[50％抑制浓度(IC50=0.89μg/mL].抗体可变区基因家系分析表明,该抗体属于IGHV1-18家系,重链可变区(VH)自体突变率为12％,低于广谱中和抗体VRC01VH的自体突变率(32％).结论 建立的单克隆特异性Memory B分选方法,可以获得有中和能力的抗体.该平台有希望获得具有我国自主知识产权的广谱中和抗体,并为开发抗体药物和设计新型免疫原提供技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵一鸣		140	694	14.0	20.0
2	李丹		22	285	9.0	16.0
3	洪坤学		22	69	6.0	7.0
4	梁华		16	32	3.0	5.0
5	任莉		4	0	0.0	0.0
6	王铮		2	0	0.0	0.0
7	王硕		15	252	6.0	15.0
8	鞠斌		1	0	0.0	0.0
9	李亚峰		1	0	0.0	0.0