转录因子STAT1两个亚型STAT1α和STAT1β高表达载体的构建及鉴定

• 作者: 伊静 刘莉 吕社民 张富军 李冬民 李玥 李靖 杜小娟 杨旭东 梁栋 武丽涛 蓝茜 闫小飞
• 来源期刊: 国外医学（医学地理分册）
• 学科: 医学
• 关键词: 转录因子STAT1 STAT1α STAT1β pLJM1-EGFP表达载体
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 49-53
• 页数: 5页
• 分类号: R575|5
• 字数: 3245字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8883.2016.01.011

摘要

目的：利用高表达载体pLJM1‐EGFP构建并鉴定转录因子STAT1基因的2个亚型STAT1α和STAT1β的过表达重组质粒（简称为pLJM1‐STAT1α和pLJM1‐STAT1β）。方法以大鼠肝脏cDNA 为模板，PCR获取目的片段（即STAT1α和STAT1β）；用AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切pLJM1‐EGFP表达载体和PCR扩增的STAT1α和STAT1β基因片段后，用T4 DNA连接酶连接酶切纯化后的载体及目的基因片段；将连接产物转化DH5α大肠杆菌感受态细胞、挑选阳性克隆，并通过PCR、双酶切和DNA测序鉴定构建的重组质粒。结果 PCR和双酶切证实pLJM1‐STAT1α和pLJM1‐STAT1β重组载体中分别成功插入了STAT1α和STAT1β基因片段。DNA测序结果表明插入的STAT1α和STAT1β基因片段的序列完全正确。结论成功构建了pLJM1‐STAT1α和pLJM1‐STAT1β高表达重组载体。