胚胎SD大鼠神经干细胞原代培养及分化鉴定的实验研究

• 作者: 张仁坤 张赛 李晓红 涂悦 陈彦婷 陈星
• 来源期刊: 武警后勤学院学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干细胞 原代培养 免疫荧光 分化
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 337-340,封2
• 页数: 5页
• 分类号: R329.2
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立胚胎SD大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)原代培养的方法,免疫荧光鉴定其纯度和分化潜能.[方法]取孕14d的SD大鼠,麻醉消毒后分离胎鼠大脑海马组织,研磨并胰酶消化后离心,计数后分瓶培养,倒置显微镜下观察神经干细胞生长情况.当神经球直径100～150 μm时,胰酶消化后计数传代培养.取第3代神经干细胞行巢蛋白免疫荧光染色鉴定其纯度.将第3代神经干细胞消化计数后种植于预铺多聚赖氨酸的培养板中,7d后行微管相关蛋白2(microtubulin-associated protein 2,MAP2)、胶质纤维酸性蛋广1(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫荧光染色鉴定其分化潜能.[结果]显微镜下可见神经干细胞生长良好,增殖迅速,7d左右可形成直径大小为150 μm的神经球,细胞透光度好.第3代神经干细胞经免疫荧光染色证实纯度95％以卜.分化鉴定实验可见MAP2、GFAP和MBP阳性细胞.[结论]成功建立胚胎SD大鼠神经干细胞原代培养方法,细胞状态好、纯度高.神经干细胞有多样分化潜能,可分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,为神经系统损伤修复和退变性疾病的细胞替代治疗提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张赛		95	567	12.0	19.0
2	涂悦		55	284	10.0	15.0
3	李晓红		10	22	3.0	4.0
4	张仁坤		4	1	1.0	1.0
5	陈星		2	0	0.0	0.0
6	陈彦婷		1	0	0.0	0.0