金属硫蛋白2基因在红花中表达的初步研究

• 作者: 官丽莉 李校堃 李海燕 杨晶 武云云 滕孝花 胡人阁 郭咏昕 陈昱
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 红花 金属硫蛋白 油体 Southern blotting检测 根瘤农杆菌 重组质粒
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 2152-2156
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.12.023

摘要

目的 获得转金属硫蛋白2 (metallothionein 2,MT2)红花植株,为MT药用蛋白的生产奠定基础.方法 采用Nco Ⅰ/Hind Ⅲ酶切pEASY-oleosin-MT获得oleosin-MT融合基因,将其插入到植物油体高效表达载体pOP上,构建重组质粒pOP-oleosin-MT,进行PCR和双酶切鉴定.采用冻融法将重组质粒pOP-oleosin-MT转入根瘤农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化红花,对转MT基因红花植株进行PCR检测及Southern blotting检测.结果 成功构建了MT基因的植物油体表达载体pOP-oleosin-MT,获得了3株PCR检测呈阳性的转MT基因红花植株.结论 建立了完善的红花再生体系,获得了转MT基因的红花植株.