毕赤酵母GS115表达HSA-GCSFm的诱导工艺研究

• 作者: 丁健 周月涵 李华钟 李清亮 段作营 金坚
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 毕赤酵母 HSA-GCSFm 甲醇流加策略 胰蛋白胨 山梨醇
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 8-13
• 页数: 6页
• 字数: 4722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2016.02.002

摘要

本文探讨了甲醇流加控制、添加胰蛋白胨和甲醇/山梨醇共混诱导对重组毕赤酵母GS115/pPIC9K-HSA-GCSFm表达HSA-GCSFm的影响.结果显示:甲醇供应充足条件下HSA-GCSFm表达水平仅为37 mg·L-1,而甲醇添加受限条件下HSA-GCSFm表达水平可达到239mg·L-1;甲醇添加受限并添加胰蛋白胨条件下,HSA-GCSFm表达水平可以提高到266 mg·L-1;在此基础上,流加山梨醇作为辅助碳源,表达水平可大幅提高至424 mg·L-1.通过对各诱导条件下OUR、胞外蛋白酶及碳流分配进行分析后发现,将甲醇限制在低浓度同时添加胰蛋白胨与山梨醇,可以改善细胞代谢活性,增加细胞用于HSA-GCSFm合成的碳流分配量,降低胞外蛋白酶活性,从而提高了HSA-GCSFm的表达水平并缓解了HSA-GCSFm的降解.因此,该诱导工艺适于毕赤酵母高效表达HSA-GCSFm.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金坚	江南大学药学院	196	1025	16.0	22.0
2	段作营	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	84	674	14.0	21.0
3	李华钟	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	63	592	13.0	22.0
4	丁健	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	21	82	4.0	8.0
5	李清亮	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	1	3	1.0	1.0
6	周月涵	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	1	3	1.0	1.0