人微小非编码RNA-183和MMP-9对食管癌细胞Eca109增殖的作用及其相互调控关系

• 作者: 刘文健 梁宇强 梁清 王茂生 黄健
• 来源期刊: 广东医学
• 关键词: 人微小非编码RNA-183 基质金属蛋白酶-9 食管癌 Eca109细胞株 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 981-984
• 页数: 4页
• 字数: 4008字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨人微小非编码RNA-183(Hsa-miR-183)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在食管癌组织和食管鳞癌细胞株Eca109中的表达及相互调控关系.方法 采用RT-PCR法检测食管癌组织、食管正常组织、正常食管上皮细胞Het-1A和Eca109细胞株中Hsa-miR-183与MMP-9的相对表达水平.构建人Hsa-miR-183的真核表达载体质粒PmiR-183,以脂质体2000转染至Eca109细胞,Eca109细胞分为3组:空白对照组不含任何质粒或脂质体,阴性对照组含空质粒2 000 μg/mL、脂质体20 μg/mL,PmiR-183组含PmiR-183 20μg/mL.构建psiCHECK-2-MMP-9-3'UTR载体.WST-8法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测Hsa-miR-183及MMP-9 mRNA的表达水平,Western blot法检测MMP-9蛋白的表达水平;荧光素酶报告基因实验验证Hsa-miR-183与MMP-9的靶位关系,设计针对MMP-9序列的小干扰RNA,转染Eca109细胞株,检测Hsa-miR-183的相对表达水平.结果 Hsa-miR-183在食管癌组织和Eca109细胞株中的相对表达水平较食管正常组织和Het-1A细胞株中低(P＜0.05),MMP-9在食管癌组织和Eca109细胞株中的相对表达水平较食管正常组织及Het-1A细胞株中高(P＜0.05).与阴性对照组比较,PmiR-183组对Eca109细胞24、48、72 h的增殖抑制率差异有统计学意义(P＜0.05),呈时间-效应关系;psiCHECK-2-MMP-9-3'UTR质粒与Hsa-miR-183共转染293T细胞,荧光素酶的活性降低;转染PmiR-183至Eca109细胞后,MMP-9基因mRNA与蛋白表达水平均降低;敲除MMP-9表达之后,Hsa-miR-183的表达水平显著升高.结论 PmiR-183可有效抑制Eca109细胞的增殖,呈时间-效应关系,Has-miR-183可能参与MMP-9在Eca109细胞的表达调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄健	广东省茂名市人民医院胸外科	30	101	6.0	9.0
2	王茂生	广东省高州市人民医院胸外科	11	6	2.0	2.0
3	梁宇强	广东省茂名市人民医院胸外科	18	59	4.0	7.0
4	梁清	广东省茂名市人民医院胸外科	13	39	3.0	6.0
5	刘文健	安徽中医药大学第一附属医院胸外科	2	6	2.0	2.0