同源重组与Gibson Assembly方法构建腺病毒载体

• 作者: 潘耀振 邓楚钟
• 来源期刊: 贵阳医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒 疫苗 重组载体 Gibson Assembly
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 430-435
• 页数: 6页
• 分类号: R346
• 字数: 4586字
• 语种: 中文

摘要

目的：对比同源重组与Gibson Assembly两种方法构建腺病毒载体的效率。方法：增殖并提取AD4 DNA，分别用同源重组与Gibson Assembly两种方法，将AD4 DNA镶嵌入pBR322质粒，构建出携带有全长AD4 DNA的腺病毒载体，并进行PCR和测序鉴定，对比两种方法构建腺病毒载体的筛选效率。结果：两种方法均能构建出正确的腺病毒载体；筛选同源重组法1000个菌落中，鉴定360个，仅有1个菌落；Gibson Assembly法112个菌落数中，鉴定其中10个，有3个阳性。结论：Gibson Assembly方法比传统同源重组方法在构建腺病毒载体时更有效。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘耀振	贵州医科大学附院肝胆外科	29	75	4.0	8.0
2	邓楚钟	贵州医科大学附院肝胆外科	1	3	1.0	1.0