Statistical culture-based strategies to enhance chlamydospore production byTrichoderma harzianum SH2303 in liquid fermentation

• 来源期刊: 浙江大学学报（英文版）（B辑：生物医学和生物技术）
• 关键词: 哈茨木霉菌 SH2303 厚垣孢子 Plackett-Burman筛选 Box-Behnken设计 液体发酵优化
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 页码范围: 619-627
• 页数: 9页
• 语种: 英文

摘要

题目：哈茨木霉菌SH2303高产厚+孢子液体发酵优化目的：鉴于厚+孢子为主要活性成分的木霉菌剂具有抗逆性强、存活期长、易贮藏等特点，更容易满足实际生产需求，本文利用系统的液体发酵策略，优化木霉菌高产厚+孢子液体发酵条件，同时降低发酵成本，指导未来木霉菌厚+孢子生防菌剂研发。创新点：采用从开放到闭合的递进式液体发酵筛选优化模式，通过Plackett-Burman设计和Box-Behnken优化设计确定影响木霉菌产厚+孢子的关键因子及最佳发酵条件，确定玉米粉作为基础培养基，添加甘油和调节 pH相结合的液体发酵策略，在降低发酵成本的同时提高厚+孢子产量。方法：以玉米粉为基础培养基，通过 Plackett-Burman筛选实验，从8个候选的发酵因子中初步确定玉米粉、甘油和发酵液起始pH值三个显著因子。进而利用响应面中的Box-Behnken设计（表5）三个因素为自变量，厚+孢子产量为响应值，通过Design Expert 7.0软件对实验数据进行多项式回归分析，建立多元二次回归方程。通过方差分析，最终确定木霉菌SH2303高产厚+孢子液体发酵工艺的最佳参数。结论：确定了影响厚+孢子形成的三个关键的发酵因子：玉米粉、甘油和起始pH值。获得厚+孢子形成最佳的液体发酵条件：玉米粉62.86 g/L，甘油7.54 ml/L，起始pH 4.17，发酵6天。实际最大厚+孢子产量4.5×108孢子/ml，与模型预测值3.6×108孢子/ml相当。厚+孢子产量与优化前相比提高8倍，可用于指导低成本的木霉菌厚+孢子新型生防菌剂开发。