实时荧光环介导等温扩增技术检测牛乳中的蜡样芽孢杆菌

• 作者: 付博宇 张伟 张先舟 王羽 苑宁 贾雅菁 马晓燕
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 实时荧光环介导等温扩增检测技术 蜡样芽胞杆菌 检测 牛乳
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 安全检测
• 页码范围: 184-189
• 页数: 6页
• 分类号: TS207.4
• 字数: 3420字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201606033

摘要

建立牛乳中蜡样芽孢杆菌便捷可靠的检测方法,根据已公布的蜡样芽孢杆菌hblA基因序列设计内外引物,并向反应体系中加入荧光染料SYBRGreen Ⅰ,利用实时荧光监测仪,建立实时荧光环介导等温扩增技术(real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification,RealAmp)检测蜡样芽孢杆菌的方法,扩增产物经电泳和酶切鉴定.通过21株致病菌验证RealAmp特异性,并比较了RealAmp与普通环介导等温扩增技术的敏感性,对人工污染的检出限进行了测定.结果表明对21株致病菌进行特异性实验,4株蜡样芽胞杆菌呈阳性结果,17株非蜡样芽胞杆菌均呈阴性结果.RealAmp检测纯菌的灵敏度为8.2 CFU/mL,比普通环介导等温扩增技术的灵敏度高10倍,人工污染牛乳RealAmp的检出限为8.2 CFU/mL.并且在20 min左右即可判定结果.该方法快速、准确、灵敏度高、操作便捷、可实时监控检测蜡样芽孢杆菌,有望成为快速检测蜡样芽孢杆菌的有效方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张伟	河北农业大学食品科技学院	241	2103	25.0	35.0
2	马晓燕	河北农业大学食品科技学院	63	566	12.0	20.0
3	苑宁	河北农业大学理工学院	32	91	5.0	8.0
4	张先舟	河北农业大学食品科技学院	26	199	9.0	13.0
5	王羽	河北农业大学食品科技学院	26	179	9.0	12.0
6	付博宇	河北农业大学食品科技学院	7	45	4.0	6.0
7	贾雅菁	河北农业大学食品科技学院	1	22	1.0	1.0