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高山被孢霉中Δ6脱饱和酶关键位点及其对活性的影响
高山被孢霉中Δ6脱饱和酶关键位点及其对活性的影响
作者:
史海粟
张灏
陈卫
陈永泉
陈海琴
顾震南
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
Δ6脱饱和酶
高山被孢霉
定点突变
摘要:
高山被孢霉中Δ6脱饱和酶(MaFADS6)是决定ω3/ω6多不饱和脂肪酸代谢流的关键酶.利用定点突变技术研究MaFADS6-I一级结构与功能的关系,为高山被孢霉多不饱和脂肪酸的合成提供了理论依据.利用非链取代式质粒扩增技术对已构建质粒pYES2/NT C-MaFADS6-I内的表达单元(即MaFADS6-I)中细胞色素b5区(HPGG)下游的位点进行定点突变,将所有突变体分别转化酿酒酵母进行诱导表达,进一步通过在培养基中添加Δ6脱饱和酶的底物来考察重组菌对各底物的催化作用.实验结果表明,所有突变体催化α-亚麻酸(ALA)的活性没有改变;K61和D68两个位点对催化亚油酸(LA)起关键作用,其对应的4个突变体对LA的转化率分别为(6.2±0.5)%(K61T)、(0.3±0.0)% (K61F)、(8.2±0.7)% (D68N)和(6.6±0.8)%(D68L),相比原始转化率各降低50%以上;G63和T69两个位点对LA的催化无直接影响,但G63T突变体由于突变位点极性改变,其对LA的转化率为(8.5±0.9)%,比原始转化率降低了49.9%;而V66位点的突变体对LA的转化率分别为(22.3±2.6)% (V66T)和(20.7±2.5)% (V66A),比原始转化率分别降低了36.1%和37.8%.确定了MaFADS6-I氨基酸序列中K61和D68两个关键氨基酸位点经突变后均会使其酶活明显降低,这为研究MaFADS6-I一级结构与功能的关系提供了理论依据.
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篇名
高山被孢霉中Δ6脱饱和酶关键位点及其对活性的影响
来源期刊
食品与发酵工业
学科
关键词
Δ6脱饱和酶
高山被孢霉
定点突变
年,卷(期)
2016,(9)
所属期刊栏目
研究报告
研究方向
页码范围
1-7
页数
7页
分类号
字数
3734字
语种
中文
DOI
10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201609001
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
张灏
江南大学食品学院
256
2062
22.0
32.0
2
陈卫
江南大学食品学院
321
2250
22.0
31.0
3
陈海琴
江南大学食品学院
54
134
6.0
7.0
4
陈永泉
江南大学食品学院
32
51
4.0
5.0
5
顾震南
江南大学食品学院
14
28
3.0
4.0
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史海粟
江南大学食品学院
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节点文献
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高山被孢霉
定点突变
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
食品与发酵工业
主办单位:
中国食品发酵工业研究院有限公司
全国食品与发酵工业信息中心
出版周期:
半月刊
ISSN:
0253-990X
CN:
11-1802/TS
开本:
大16开
出版地:
北京酒仙桥中路24号院6号楼
邮发代号:
2-331
创刊时间:
1970
语种:
chi
出版文献量(篇)
12595
总下载数(次)
34
总被引数(次)
107055
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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