甲型流感病毒纯化及病毒生物学特征分析

• 作者: 余鹏博 刘杨 胡军 赵向绒 郭春艳
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 甲型流感病毒 蔗糖密度梯度超速离心 免疫原性
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 技术方法研究
• 页码范围: 897-900
• 页数: 4页
• 分类号: R373.1+3
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201606025

摘要

目的 评价蔗糖密度梯度离心纯化甲型流感病毒的方法,并对纯化的病毒颗粒特征和免疫原性进行分析.方法 接种鸡胚培养病毒,收获尿囊液,超速离心浓缩,蔗糖密度梯度离心纯化病毒,用血凝试验、蛋白定量、透射电镜和SDS-PAGE鉴定病毒颗粒.取病毒纯化产物以0.03 mg/只和0.005 mg/只分组免疫小鼠,采集小鼠血清,利用血凝抑制试验测定血清血凝抑制滴度.结果 成功利用蔗糖密度梯度离心法纯化出流感病毒,病毒原液经纯化后被分离成L、M、H三个病毒带,其中M病毒带的吸光度、蛋白浓度及血凝滴度最高,蛋白浓度可达1.2 mg/mL,血凝滴度高达1×49.电镜观察显示,L区带为具有血凝活性的质膜和结构疏松的病毒组成,M区带病毒颗粒呈球形、丝状或棒状.同时,有大量空心病毒颗粒存在.H区带与M区带类似,但未发现空心病毒颗粒.纯化的病毒免疫小鼠后可产生具有较高血凝抑制活性的抗体.结论 蔗糖密度梯度离心技术可用于流感病毒抗原的制备,且不影响病毒的免疫原性.因此,密度梯度离心法可为流感病毒的基础研究及疫苗开发提供技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡军	陕西省人民医院中心实验室	33	144	7.0	11.0
3	刘杨	陕西省人民医院中心实验室	19	179	8.0	13.0
7	余鹏博	陕西省疾病预防控制中心病毒所	38	213	7.0	13.0
10	郭春艳	陕西省人民医院中心实验室	7	57	3.0	7.0
12	赵向绒	陕西省人民医院中心实验室	14	70	4.0	8.0