新型核酸适配体荧光纳米微粒用于人干扰素-γ的测定

• 作者: 何威 冯帆 孙宏利 宋佳凝 张李钰 杨颖 武海滨
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 化学
• 关键词: 核酸适配体 IFN-γ 磁性纳米颗粒 三明治夹心结构 荧光
• 年，卷（期）: 2016,（27）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5241-5245,5269
• 分类号: O652|R446
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2016.27.010

摘要

目的:利用由两条核酸适配体与人干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)的高亲和力构建的三明治结构和磁性纳米颗粒的磁性分离技术,设计并制作了一种新型荧光纳米微粒,建立基于核酸适配体的新型荧光纳米微粒用于人IFN-γ的检测.方法:流式细胞术检测IFN-γ核酸适配体B1-4和T2对IFN-γ的结合特异性;将生物素修饰的B1-4固定于链霉亲和素包被的纳米磁珠上,连接B1-4的纳米磁珠可通过B1-4与IFN-γ的亲和性捕获IFN-γ,再利用另一条FAM修饰的IFN-γ核酸适配体T2形成(B1-4)-(IFN-γ)-(T2)三明治夹心结构,构建新型核酸适配体荧光纳米微粒;IFN-γ分别与核酸适配体荧光纳米微粒孵育不同时间以探索该检测系统中IFN-γ与磁珠的最佳孵育时间;流式细胞术检测磁珠12h内荧光变化,探索时间对检测体系的影响;流式细胞术检测与不同浓度IFN-γ孵育的磁珠表面荧光强度,绘制IFN-γ检测标准曲线;检测血清对检测特异性的影响.结果:B1-4和T2对IFN-γY的结合特异性高;三明治夹心结构对IFN-γ检测特异性好,任意改变其中一因素则磁珠表面荧光信号显著下降,三明治夹心结构构建失败;此法对IFN-γ的响应线性浓度为0～50 ng/L,其线性方程为y=3.512x+1.060,敏感度为1 ng/L;12 h内测得的荧光信号稳定,并无明显衰减;血清对体系检测特异性无明显影响.结论:成功构建核酸适配体荧光纳米微粒用于人IFN-γ的测定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯帆	沈阳军区总医院药剂科	8	20	2.0	4.0
2	孙宏利	西安市儿童医院陕西省儿科疾病研究所	4	29	2.0	4.0
3	张李钰	西安市儿童医院陕西省儿科疾病研究所	5	2	1.0	1.0
4	杨颖	西安市儿童医院陕西省儿科疾病研究所	6	1	1.0	1.0
5	何威	西安市儿童医院陕西省儿科疾病研究所	1	0	0.0	0.0
6	宋佳凝	西安市儿童医院口腔科	1	0	0.0	0.0