杆状病毒-昆虫细胞系统表达的戊型肝炎病毒衣壳蛋白p495的纯化、结构解析以及免疫原性分析

• 作者: 俞海 张振勇 张玉云 李婷婷 林庆山 王凯航 蒋婕 郑明华 郑清炳
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 戊型肝炎病毒 病毒样颗粒 真核表达系统 HEVP495蛋白冷冻电镜三维重构 免疫应答
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 342-348
• 页数: 7页
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文

摘要

本研究目的是利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统建立戊型肝炎病毒(HEV) p495蛋白的高效稳定表达和可放大纯化的方法,研究其理化性质和解析三维结构,与上市戊肝疫苗益可宁(Hecolin)进行免疫原性的比较.本研究选择基因1型HEV毒株的开放读码框2(ORF2)的aa112-606片段构建杆状病毒,感染昆虫细胞进行重组蛋白的表达,经过PEG沉淀和阴离子交换层析的纯化,获得纯度为95％以上的p495蛋白,每升细胞培养液最终获得15mg的目的蛋白.经ELISA、分析超离、分子排阻色谱和电镜负染等分析显示p495蛋白具有良好的抗原性且呈现为均一的病毒样颗粒(VLP),沉降系数为51.3S,颗粒直径约20nm.冷冻电镜三维结构解析获得分辨率为3.8A的三维结构,揭示p495形成了T=1的等二十面体结构,与已报道的晶体结构相一致.小鼠免疫实验表明p495蛋白与益可宁中p239抗原的免疫原性相当.本研究为进一步开展HEV的受体鉴定、表位结构研究以及疫苗改进等奠定良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑清炳		2	0	0.0	0.0
2	林庆山		2	0	0.0	0.0
3	蒋婕		1	0	0.0	0.0
4	李婷婷		2	0	0.0	0.0
5	张玉云		2	0	0.0	0.0
6	张振勇		1	0	0.0	0.0
7	郑明华		1	0	0.0	0.0
8	王凯航		2	0	0.0	0.0
9	俞海		2	0	0.0	0.0