甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究

• 作者: 刘迪 王恒波 许莉萍 郭晋隆 陈利平 陈如凯 陈平华 陈忠伟 高三基
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甘蔗黄叶病毒 甘蔗花叶病毒 CP基因 双价RNAi表达载体构建 遗传转化
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 99-106
• 页数: 8页
• 分类号: S566.1
• 字数: 5824字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2016.01.018

摘要

甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治.RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能.本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列.通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体pHANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到pART27上形成干扰表达载体.利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株.通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达.