代谢工程改造大肠杆菌合成L-异亮氨酸的研究

• 作者: 张成林 张海宾 李燕军 谢希贤 陈宁 麻杰
• 来源期刊: 发酵科技通讯
• 学科: 工学
• 关键词: L-异亮氨酸 大肠杆菌 反馈抑制 苏氨酸脱水酶 乙酰羟基酸合成酶
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 133-139
• 页数: 7页
• 分类号: TQ922
• 字数: 4428字
• 语种: 中文

摘要

以L-苏氨酸生产菌Escherichia coli THRD为出发菌株,利用基因重组技术替换ilvLXGMEDA启动子并过表达解除L-异亮氨酸反馈抑制的ilvA和ilvIH,以期获得L-异亮氨酸生产菌.将ilvLXGMEDA启动子替换为强启动子Ptrc并敲除ilvLXGM后获得ILE01菌株,于该菌株中分别过表达解除L-异亮氨酸反馈抑制的ilvIH及共表达解除L-异亮氨酸反馈抑制的ilvA和ilvIH,获得菌株ILE02和ILE03,其L-异亮氨酸产量分别达到1.75 g/L和2.19g/L.针对ILE03 α-酮丁酸积累量过高的问题,通过改变操纵子中ilvA和ilvIH的顺序调节其转录水平,获得菌株ILE04,其L-异亮氨酸产量达2.85 g/L.利用ILE04于5L发酵罐中进行发酵实验,L-异亮氨酸产量、发酵强度及转化率分别为5.23 g/L、0.17 g/(L·h)及4.6％.