一种不对称水解（R,S）-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯的新酯酶基因的克隆表达和酶学性质研究

• 作者: 卢亚南 姚星超 张利坤 张朝晖 杨玉莹 董剑鸣 陆跃乐
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 反硝化无色杆菌 酯酶 克隆表达 (R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯 酶学性质
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 35-41
• 页数: 7页
• 字数: 4541字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2016.05.006

摘要

本文将来自反硝化无色杆菌Achromobacterdenitrificans1104的酯酶基因EHest,转化大肠杆菌中,成功表达了具有不对称水解农药甲霜灵的中间体(R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯( MAP )活性的酯酶EHesterase。用重组酯酶EHesterase催化MAP 的水解,底物浓度50 g/L,反应1h的转化率29.5%,产物( R-酸)的eep 是85.1%。该酶的最适反应pH和温度分别为9.0和50℃,在50℃以下和pH5~9之间具有较好的稳定性。该酶水解MAP 的米氏动力学参数Vm、Km 分别是0.733 g/(L·min)和7.49 g/L。加入10%DMSO对酶EHesterase的立体选择性和催化速度有一定的促进作用。 Cu2+、Fe3+对酶活有明显抑制作用。该酶水解MAP 的活性与水解p-对硝基苯乙酸酯的活性数量级相当,是水解橄榄油活性的333倍。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张朝晖	浙江工业大学生物工程学院	62	616	13.0	22.0
2	陆跃乐	浙江工业大学生物工程学院	13	8	2.0	2.0
3	杨玉莹	浙江工业大学生物工程学院	2	2	1.0	1.0
4	董剑鸣	浙江工业大学生物工程学院	1	2	1.0	1.0
5	张利坤	浙江工业大学生物工程学院	3	3	1.0	1.0
6	卢亚南	浙江工业大学生物工程学院	3	2	1.0	1.0
7	姚星超	浙江工业大学生物工程学院	1	2	1.0	1.0