IL-15基因对犬细小病毒VP2DNA疫苗的免疫增强作用

• 作者: 仲飞 吴峰洋 崔丹 张建楼 张永红 徐建 李楠 霍珊珊
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 犬白介素-15 免疫佐剂 犬细小病毒 VP2基因疫苗
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 页码范围: 99-104
• 页数: 6页
• 分类号: Q939
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2016.0115

摘要

为弄清犬白介素-15(cIL-15)能否增强犬细小病毒VP2 DNA疫苗的免疫原性,本研究首先通过RT-PCR方法从犬脾脏淋巴细胞中扩增全长cIL-15 cDNA基因,并构建其与Myc-His-tag融合和非融合的表达载体:pcDNA-cIL-15/MH和pcDNA-cIL-15.将pcDNA-cIL-15/MH载体转染HEK293T细胞,确定构建的表达载体能否介导cIL-15进行分泌表达.利用过去构建的VP2表达载体和pcDNA-cIL-15载体共免疫小鼠,用ELISA检测免疫后小鼠血清中的抗体滴度,并用MTT检测小鼠淋巴细胞的增殖活性和用ELISA测定淋巴细胞干扰素-γ和IL-4的表达.结果显示,构建的cIL-15表达载体能够介导cIL-15在真核细胞中的分泌表达.用VP2和cIL-15表达载体共免疫小鼠,抗体水平明显高于VP2载体单免疫组(P＜0.01).当免疫35 d时,共免疫组淋巴细胞的刺激指数、干扰素-γ和IL-4的表达水平均明显高于VP2载体单免疫组(P＜0.05).结果表明,cIL-15可明显增强VP2 DNA疫苗的免疫原性.