应用Tem-PCR技术同时检测3种致病菌的研究

• 作者: 刘佳 刘忠梅 徐义刚 曲敏 李苏龙 莫春生
• 来源期刊: 哈尔滨商业大学学报（自然科学版）
• 学科: 工学
• 关键词: 靶序列富集多重PCR方法 沙门氏菌 单核细胞增生李斯特氏菌 大肠埃希氏菌O157
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 食品与化学工程
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 分类号: TS207
• 字数: 3272字
• 语种: 中文

摘要

应用靶序列富集多重PCR (target enriched multiplex PCR,Tem-PCR)技术建立同时检测沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157三种致病菌的高通量简易检测方法.实验分别以沙门氏菌的invA基因、单核细胞增生李斯特氏菌的hly基因、大肠埃希氏菌O157 rfbE基因为靶基因,设计3对特异性引物,并与通用引物连接组成Tem-PCR引物,通过反应条件优化,建立了Tem-PCR检测方法.结果表明,建立的Tem-PCR方法特异性强,其检测灵敏度分别为沙门氏菌1.1×103CFU/mL、单核细胞增生李斯特氏菌5.6×102 CFU/mL、大肠埃希氏菌O157 2.3×103 CFU/mL.方法不需要优化调整各引物对的浓度,易于使用,有效地解决了传统多重PCR方法扩增效率不均衡的问题.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐义刚		33	254	9.0	13.0
2	曲敏	哈尔滨商业大学食品工程学院	42	425	10.0	20.0
3	刘忠梅		20	113	7.0	8.0
4	李苏龙		22	151	9.0	10.0
5	莫春生	哈尔滨商业大学食品工程学院	4	13	2.0	3.0
6	刘佳		1	0	0.0	0.0