AKT-糖原合成激酶-3β信号通路对SOD1G93A突变N2a细胞的保护作用

• 作者: 刘永新 刘焕彩 周风华 王巧真 管英俊 赵春艳 陈燕春 马晓君
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肌萎缩侧索硬化症 成神经瘤细胞N2a AKT 糖原合成激酶-3β 细胞周期蛋白D1 免疫印迹法 小鼠
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 神经生物学
• 页码范围: 433-441
• 分类号: R329
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.001

摘要

目的 探讨AKT-糖原合成激酶-3β(GSK-3β)信号通路对SOD1G93A突变N2a细胞的作用及机制.方法 选取小鼠成神经瘤细胞系N2a,分别转染pEGFP-WT-SOD1和pEGFP-G93A-SOD1质粒,应用Western blotting和免疫荧光染色方法检测AKT、GSK-3β和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在细胞模型中的表达变化.应用RT-PCR和Western blotting技术检测siRNA沉默AKT后GSK-3β和cyclin D1在SOD1突变N2a细胞中的表达变化,通过MTS方法,检测细胞增殖和存活的改变.结果 与pEGFP-WT-SOD1转染的N2a细胞比较,pEGFP-G93A-SOD1转染的N2a细胞中AKT及GSK-3β总蛋白在转染后24 h和48 h表达均无明显变化,p-AKT(Ser473)、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1表达均升高.免疫荧光染色结果显示,转染后24 h和48 h,p-AKT(Ser473)、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1在pEGFP-G93A-SOD1转染的N2a细胞中表达均升高.应用siRNA沉默AKT后与对照组相比,在转染后48 h和72h,AKT、p-AKT(Ser473)、GSK-3β、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1蛋白均降低.MTS实验结果显示,在AKT沉默后72h、96 h、120 h,N2a细胞增殖和活力降低.结论SOD1G93A突变影响N2a细胞中AKT、GSK-3β翻译后磷酸化修饰及cyclin D1的表达,AKT可能通过调控GSK-3β和cyclin D1影响SOD1G93A突变N2a细胞的增殖和存活.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	管英俊	潍坊医学院组织学与胚胎学教研室	135	541	11.0	15.0
2	周风华	潍坊医学院组织学与胚胎学教研室	65	112	5.0	6.0
3	刘焕彩	潍坊医学院附属医院关节外科	32	127	7.0	9.0
4	陈燕春	潍坊医学院组织学与胚胎学教研室	62	166	7.0	9.0
5	马晓君	潍坊医学院组织学与胚胎学教研室	10	42	3.0	6.0
6	赵春艳	潍坊医学院组织	21	52	4.0	6.0
7	刘永新	潍坊医学院组织学与胚胎学教研室	12	26	3.0	5.0
8	王巧真	潍坊医学院人体解剖学教研室	18	52	4.0	6.0