CPA-核酸试纸条检测鸭肉源性成分方法的建立和优化

• 作者: 冯涛 张颖洁 李素芳 杨韩 潘家荣
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 交叉引物恒温扩增 核酸试纸条 D-loop基因 鸭肉成分
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 农产品辐照研究·食品科学
• 页码范围: 2151-2159
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2016.11.2151

摘要

为建立简单、有效的动物源性成分定性检测方法,根据交叉引物恒温扩增技术(CPA)原理,以鸭属线粒体D-loop基因序列设计引物和探针,优化反应体系与恒温扩增条件,并配合核酸试纸条显色,建立鸭肉源性成分的快速检测方法.结果表明,建立的鸭D-loop基因CPA扩增体系中交叉引物、内引物、外引物分别为0.6、0.3、0.1μmol· L-,MgSO4为8 mmol·L-1.在63℃、60min恒温扩增条件下,单一鸭源性DNA成分检出限为0.1 ng· μL-1,对混合肉制品中鸭肉成分的检出比例为1％(相当于1ng·μL-1).本研究建立的鸭源性成分检测方法为肉制品掺假鉴定提供了有效的手段.