半滑舌鳎AKT-ineracting protein基因的克隆及免疫应答表达分析

• 作者: 于孟君 仇雪梅 刘洋 孙璐明 沙珍霞 陈亚东 陈学杰
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 半滑舌鳎 AKT-interacting protein基因 基因克隆 免疫应答 基因表达
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 页码范围: 467-473
• 页数: 7页
• 分类号: Q522
• 字数: 4226字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2016.62

摘要

研究克隆了半滑舌鳎Cynoglossus semilaevis膜蛋白AKT-interacting protein (AKTIP)基因,研究了其在健康组织中的表达模式、鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染后免疫组织和不同病原物刺激外周血淋巴细胞中的表达特征.通过常规克隆和RACE技术,获得的半滑舌鳎AKTIP基因全长cDNA序列为1224 bp,其中包括5'-UTR为116 bp,3'-UTR为117 bp和完整的ORF序列891 bp,编码296个氨基酸,预测蛋白质的等电点(PI)为9.12,分子量是33.74 kD;同源比对发现半滑舌鳎AKTIP的氨基酸序列在不同物种之间具有较高的保守性;荧光实时定量PCR (qRT-PCR)检测到半滑舌鳎各个组织中均有AKTIP基因的表达,在卵巢中表达量最高;鳗弧菌感染半滑舌鳎后,AKTIP基因在肝、鳃、血液、肠、头肾和脾中均上调表达;病原模拟物PGN、LPS、poly I:C和WGP刺激半滑舌鳎外周血淋巴细胞均诱导AKTIP基因下调表达.研究表明半滑舌鳎AKTIP基因参与了机体免疫反应,为给半滑舌鳎免疫防御技术的研究提供理论依据.