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摘要:
[目的]Gal80ts与Gal4组合驱动UAS转基因表达是黑腹果蝇Drosophila melanogaster研究中常用的转基因过表达遗传学工具,通过温度控制实现对UAS转基因表达的灵活开关.Gal80ts是一种温度敏感型蛋白,低温下(18℃)与Gal4蛋白结合并抑制其转录活力,高温下(29℃)解除对Gal4的抑制,从而允许Gal4结合UAS位点,启动UAS转基因的表达.但是从18~29℃的开关只能强烈过表达UAS转基因,而不能灵活调控转基因的表达水平.本实验系统研究一系列温度下转基因的表达水平,从而实现该体系对转基因的表达水平的灵活控制.[方法]以果蝇翅芽这一常用器官组织为研究模型,以2种Gal4品系(dpp-Gal4和en-Gal4,分别由decapentaplgic和engrailed基因的启动子驱动)分别与tub-Gal80ts(微管蛋白基因tubulin启动子驱动)基因重组后,再分别与UAS-wg(wingless)转基因品系杂交;在一系列温度(18,25,27.5,28,28.5和30℃)下进行子代幼虫培养,通过免疫组化染色揭示并量化分析转基因wg在3龄幼虫翅芽上的表达水平.[结果]18 ~ 25℃培养条件下,Gal80ts与Gal4组合系统中的UAS转基因不能表达;30℃时培养,转基因强烈地过表达;在25 ~ 30C区间内,随着温度升高,转基因表达水平逐渐上升.[结论]在25~30℃之间的温度调控可以实现对Gal80ts与Gal4组合系统中的UAS转基因表达水平的调控.本研究结果对调控转基因表达程度有重要价值.
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文献信息
篇名 Gal80ts与Gal4组合灵敏控制果蝇中UAS转基因的表达水平
来源期刊 昆虫学报 学科 生物学
关键词 黑腹果蝇 Gal4/UAS系统 Gal80ts UAS转基因 基因表达水平 荧光强度
年,卷(期) 2016,(5) 所属期刊栏目 生理与生化
研究方向 页码范围 481-488
页数 分类号 Q966
字数 语种 中文
DOI 10.16380/j.kcxb.2016.05.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 马恩波 山西大学应用生物学研究所 170 2032 22.0 34.0
2 张建珍 山西大学应用生物学研究所 75 561 13.0 19.0
3 张徐波 山西大学应用生物学研究所 6 6 2.0 2.0
4 李开霞 山西大学应用生物学研究所 3 4 1.0 2.0
8 赵一丹 山西大学生命科学学院 1 3 1.0 1.0
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黑腹果蝇
Gal4/UAS系统
Gal80ts
UAS转基因
基因表达水平
荧光强度
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