花粉致死基因 ZmAA1对玉米遗传转化的研究

• 作者: 刘宏伟 刘文国 吕庆雪 孟令聪 宋广树 张志军 李春雷 王敏
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米 ZmAA1 基因 启动子 Pg47 遗传转化
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 页码范围: 101-106
• 页数: 6页
• 分类号: S513.03
• 字数: 3767字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2016.03.015

摘要

为了研究花粉致死基因 ZmAA1的功能，进而创制转 ZmAA1基因玉米不育新材料。在 GenBank 中找到花粉致死基因 ZmAA1及启动子 Pg47，并在目的片段的上下游设计増加酶切位点，基因合成构建到克隆载体 puc57上，采用传统酶切连接的方法构建了植物表达载体 pCAMBIA3300-Pg47-ZmAA1-35S-bar，并利用农杆菌介导法转化优良玉米自交系郑58萌动胚。成功构建植物表达载体 pCAMBIA3300-Pg47-ZmAA1-35S-bar；共获得94株除草剂抗性植株，其中47株目的片段 PCR 呈阳性反应，对温室中表现为花粉败育的 PCR 阳性植株进行目的片段及筛选标记 bar 基因RT-PCR与蛋白免疫学试纸条检测，结果表明，花粉致死基因 ZmAA1及启动子 Pg47已经整合到玉米基因组并表达。