梅花鹿 CGI99基因 RNAi 慢病毒载体的构建及其对鹿茸干细胞增殖的影响

• 作者: 孙红梅 张伟 李春义 褚文辉 路晓
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 鹿茸 RNAi CGI99 基因 鹿茸干细胞
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 117-121
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.08.018

摘要

利用慢病毒介导的基因沉默体系，对梅花鹿生茸区骨膜干细胞（AP）中 CGI99基因进行 RNA 干扰，并初步研究该基因对细胞增殖的影响。设计出1条针对梅花鹿 CGI99基因的 shRNA 序列与载体质粒 pLVTHM 连接，之后与 pSPAX2、pMD2.G质粒共转染 HEK 293t 细胞，获得重组慢病毒，感染 AP 细胞；通过荧光定量 PCR 检测 CGI99基因的下调水平；通过 MTT 实验检测 CGI99基因沉默对 AP 细胞增殖影响。基因的表达水平大幅度下调，干扰效率达到70.8%；MTT 实验的数据曲线趋于一致。结果表明，成功构建了针对梅花鹿 CGI99基因的 RNAi 载体并干扰了 CGI99基因在 AP 细胞中的表达，且初步确定 CGI99基因对 AP 细胞的增殖并无显著影响。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张伟	中国农业科学院特产研究所特种经济动物分子生物学国家重点实验室	77	419	13.0	18.0
2	孙红梅	中国农业科学院特产研究所特种经济动物分子生物学国家重点实验室	23	96	5.0	9.0
3	李春义	中国农业科学院特产研究所特种经济动物分子生物学国家重点实验室	54	144	6.0	9.0
4	路晓	中国农业科学院特产研究所特种经济动物分子生物学国家重点实验室	8	19	3.0	4.0
5	褚文辉	中国农业科学院特产研究所特种经济动物分子生物学国家重点实验室	11	38	4.0	6.0