摘要:
目的 研究大鼠脊髓损伤后细胞自噬的变化及高压氧对其影响,探讨高压氧(hyperbaricoxygen,HBO)治疗脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的机制.方法 清洁级健康SD大鼠75只,按数字表法随机分为假手术组(Sham)、脊髓损伤组(SCI)和高压氧处理组(HBO),每组25只.采用改良Allen's法建立大鼠脊髓损伤模型,大鼠SCI后6h、1d、3d、7d、14 d对其行Basso Beattie Bresnahan(BBB)运动功能评分.分别于SCI后6h、ld、3d、7d、14d对各组大鼠处死取材,电镜下观察Sham组与SCI组大鼠脊髓组织自噬超微结构的变化,免疫印迹法检测各组大鼠自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ的变化.结果 Sham组各时间点BBB运动功能评分均为21,SCI组SCI后6h、ld、3d、7d、14 d评分分别为0、1.70±0.75、3.50±0.61、6.05±0.75、10.05±0.65,HBO组SCI后评分分别为0,2.45 ±0.65、4.05±0.70、9.15 ±0.63、13.25±0.60;SCI后7d和14 d时HBO组与SCI组比较差异有统计学意义(P<0.05).电镜下观察发现,自脊髓损伤后6h起,SCI组大鼠脊髓损伤区域的神经元和胶质细胞中均可以发现自噬体,与Sham组比较差异明显.免疫印迹检测发现,SCI组自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ表达量较Sham 组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).与SCI组比较,HBO组大鼠BBB评分升高,在7d时差异有统计学意义(p<0.05).免疫荧光检测发现,HBO组自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ表达量较SCI组明显升高,在3d时差异有统计学意义(P<0.05).结论 大鼠脊髓损伤后自噬被激活,并有一定的时间持续性,提示自噬在大鼠脊髓损伤中起一定作用.高压氧处理能够增强大鼠脊髓损伤后自噬的表达,加速细胞修复速度,此可能是高压氧治疗脊髓损伤的机制之一.