传染性造血器官坏死病病毒参考蛋白的研制

• 作者: 任彤 刘艳华 张利峰 张旻 江育林 王树云 谷强 高志强
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性造血器官坏死病病毒 参考蛋白 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 页码范围: 388-395
• 分类号: Q511|S917.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20151110139

摘要

为规避活病毒作参考物质存在的生物安全风险,本研究利用毕赤酵母表达系统表达了传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)的糖蛋白来制备参考蛋白,作为IHNV免疫学检测参考物质.本研究选用IHNV糖蛋白基因(IHNV-G)为目的基因,根据GenBank中IHNV全基因序列设计特异性引物,以IHNV-uk株病毒核酸为模板,通过RT-PCR获得糖蛋白基因片段,将其克隆至真核表达载体pPICZαA,转入毕赤酵母感受态细胞GSll5中,使外源基因与酵母基因融合,通过1％甲醇诱导表达外源蛋白,SDS-PAGE分析显示获得可溶性表达蛋白,分子量大于70 ku.经Western Blot和ELISA分析,该表达产物可以被IHNV多抗特异性识别.0.1531 mg的重组蛋白与0.3125TCID50 IHNV在ELISA实验中反应原性相当,-20℃可稳定保存2个月,说明其在一定程度上可替代病毒作为参考物质.该研究为IHNV ELISA检测试剂盒的开发奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高志强	北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心	48	143	7.0	9.0
2	谷强	北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心	31	138	6.0	11.0
3	刘艳华	北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心	24	61	4.0	7.0
4	张旻		16	40	3.0	6.0
5	张利峰		51	257	9.0	14.0
6	江育林		11	21	2.0	4.0
7	任彤	北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心	16	26	3.0	4.0
8	王树云	北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心	2	3	1.0	1.0