嗜碱芽孢杆菌 cotA 基因克隆表达及部分性质研究

• 作者: 刘友勋 耿园园 闫明阳 黄娟
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 嗜碱芽孢杆菌 芽孢外衣蛋白 漆酶 多铜离子氧化酶
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 161-168
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.08.024

摘要

为了获得具有高性能的多铜离子氧化酶，从极端微生物嗜碱芽孢杆菌（Bacillus clausii KSM-K16）中克隆表达了其芽孢外衣蛋白 CotA。根据 B. clausii KSM-K16的 CotA 序列及大肠杆菌密码子的偏爱性，设计和合成出该基因全长序列，构建pET28a-cotA 重组表达载体，将其转化到 Escherichia coli BL21（DE3）并诱导表达出重组蛋白，纯化并研究了 CotA 部分生化特性。重组 CotA 约62 kD，表现出蓝绿色并在波长609 nm 有铜离子特征吸收峰，能氧化 ABTS、SGZ 和胆红素等底物；以 SGZ 为底物，最适 pH 和温度分别为7.5和90℃；在80℃孵育2 h，能保持70%活性；在 pH4-11范围分别孵育1 h，能保持90%活性。结果显示，嗜碱芽孢杆菌 CotA 是一种具有漆酶和胆红素氧化酶活性的典型多铜离子氧化酶，表现出热和酸碱稳定性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘友勋	新乡医学院基础医学院	12	13	2.0	2.0
2	闫明阳	新乡医学院基础医学院	5	9	2.0	2.0
3	黄娟	新乡医学院基础医学院	10	13	2.0	2.0
4	耿园园	新乡医学院基础医学院	1	1	1.0	1.0