小球藻细胞壁缺陷型突变体的筛选及转化系统的建立

• 作者: 徐泽东 王亚丽 蒋思婧 黄开耀
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小球藻 转化 细胞壁缺陷 生物柴油
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 370-377
• 页数: 8页
• 分类号: Q813.5
• 字数: 5699字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2016.49

摘要

由于高效、稳定遗传转化系统的缺乏,小球藻遗传改良以及油脂代谢机理的研究等工作难以进行.研究旨在通过筛选获得小球藻Chlorella vulgaris细胞壁缺陷型突变体,在此基础上建立其转化系统.首先通过紫外诱变获得小球藻Chlorella vulgaris的突变体库,基于细胞壁缺陷型突变体在1％ Triton X-100处理后叶绿素会释放到上清中的原理,利用酶标仪高通量地从约4000个突变体中筛选获得10株细胞壁缺陷的小球藻.同时以小球藻内源性β-tubulin的启动子和终止子作为启动子和终止子,以AphⅧ(Aminoglycoside 3'-Phosphotransferase typeⅧ)作为报告基因构建了转化载体pHK203.通过优化电转缓冲液组分和电击参数,确定了细胞壁缺陷型突变体CWD-3的最佳转化条件,即2μg pHK203,ddH2O作为电转缓冲液,1500 V,525 Q,50 μF的电击条件下,转化效率可达到40个转化子/μg DNA.研究为小球藻Chlorella vulgaris的油脂代谢通路和遗传改良提供了技术基础,同时由于可降低破壁成本,筛选获得的细胞壁缺陷型突变体适于工业化生产小球藻藻粉.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋思婧	湖北大学生命科学学院	23	149	7.0	11.0
2	黄开耀	中国科学院水生生物研究所中国科学院藻类生物学重点实验室	6	6	1.0	2.0
3	王亚丽	中国科学院水生生物研究所中国科学院藻类生物学重点实验室	5	61	3.0	5.0
7	徐泽东	湖北大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0