嗜麦芽寡养单胞菌角蛋白酶基因在毕赤酵母中的表达

• 作者: 堵国成 张娟 方真 李光磊 陈坚 隆明星
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 角蛋白酶 毕赤酵母 酶学性质 双碳源 发酵优化
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 152-160
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.08.023

摘要

将嗜麦芽寡养单胞菌 BBE11-1来源的角蛋白酶基因 kerD 进行毕赤酵母密码子优化，构建重组载体 pPIC9k-kerD ；整合该重组载体到毕赤酵母 SMD1168基因组，筛选到 Mut+型重组子；对利用 G418抗性筛选到的重组子进行甲醇诱导，筛选到产酶效果最好的重组菌株。纯化和 SDS-PAGE 检测表达的重组酶，研究重组酶的部分酶学性质，结果表明，重组酶的最适反应 pH 为10，最适反应温度为60℃。为进一步提高目的蛋白的产量，采用甲醇与山梨醇和甘露醇混合流加的策略，优化重组菌产角蛋白酶的发酵过程。结果表明，甲醇与甘露醇以20∶0.5比例混合流加，发酵168 h，角蛋白酶的产量2048 U/mL，比单流加甲醇提高了87.2%。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张娟	江南大学生物工程学院	44	211	7.0	13.0
5	堵国成	江南大学生物工程学院	339	3648	30.0	42.0
9	李光磊	江南大学生物工程学院	1	6	1.0	1.0
10	方真	江南大学生物工程学院	2	6	1.0	2.0
14	隆明星	江南大学生物工程学院	1	6	1.0	1.0