重组人脑利钠肽的纯化与活性测定

• 作者: 周晓雷 张世光 张竞 朱重悦 李海潮 王岩勃 邹卫
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 人脑利钠肽 疏水作用 蛋白活性
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 223-227
• 页数: 5页
• 分类号: Q502
• 字数: 3569字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2016.02.018

摘要

目的:建立重组人脑利钠肽(BNP)的纯化方法,筛选疏水作用层析纯化介质并优化纯化条件.方法:根据带有6×His标签的DsbA-BNP融合蛋白的特性,采用金属螯合亲和层析(IMAC)、凝血酶酶切去除His-DsbA、阳离子交换层析等步骤进行粗纯;利用BNP的疏水性,分别选用不同疏水性质的介质HiTrap Butyl FF、HiTrap Phenyl(HS)及Source 15进行精纯;用SDS-PAGE和HPLC检测纯化获得的BNP的含量及纯度;用细胞法对BNP进行活性检测.结果:经IMAC、酶切去除标签蛋白及阳离子交换层析纯化后,获得纯度为60％的BNP;HiTrap Butyl FF、HiTrap Phenyl (HS)等疏水介质与BNP的吸附效果不佳,而经Source 15反相层析后,BNP的纯度可达98.98％,活性检测与对照品一致.结论:利用Source 15反相层析可获得高纯度、活性优的BNP原液,可满足后期制剂处方实验的要求,为后续研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱重悦		4	10	2.0	3.0
2	邹卫		4	10	2.0	3.0
3	周晓雷		4	10	2.0	3.0
4	张世光		3	10	2.0	3.0
5	李海潮		3	10	2.0	3.0
6	张竞		1	1	1.0	1.0
7	王岩勃		1	1	1.0	1.0