桂花C4H基因的克隆与表达特性分析

• 作者: 曾祥玲 王彩云 罗靖 郑日如
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 桂花 肉桂酸4-羟基化酶 黄酮类化合物 原核表达 基因表达
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 观赏植物
• 页码范围: 525-537
• 分类号: S685.13
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0625

摘要

利用转录组测序获得的表达序列信息,结合RACE技术,从桂花(Osmanthus fragrans)花瓣中克隆到两个参与苯丙烷代谢第2步反应的肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)基因.其ORF全长分别为1518bp和1611bp,各自编码505和536个氨基酸,命名为OfC4H1和OfC4H2(登录号分别为KR861466、KF254842).系统进化树表明,OfC4H1与矮牵牛中的PhC4H1、PhC4H2等C4H蛋白聚为一类,属于Class Ⅰ类型;OfC4H2与金银花中的LjC4H等属于Class Ⅱ类型.进一步的C4H蛋白序列多重比较发现,OfC4H1和OfC4H2蛋白具有该基因家族特有的保守结构域,在这些保守结构域中存在区别两类C4H蛋白的典型特征.利用Real-time PCR比较分析了OfC4H1和OfC4H2基因的时空表达模式,结果显示,OfC4H1在花瓣中的表达量最高;OfC4H2在花瓣中的表达量较低,在花梗、雌蕊和幼叶等组织中表达量较高.构建原核表达载体pET6xHN-C4Hs,转化Transetta (DE3)大肠杆菌并诱导表达的结果表明,目的蛋白能在原核表达系统中顺利表达,而且与预期大小一致,但因溶解度较低无法进行酶活性分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王彩云	华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室	51	954	16.0	30.0
2	罗靖	华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室	3	34	3.0	3.0
3	曾祥玲	华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室	4	25	2.0	4.0
4	郑日如	华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室	6	33	3.0	5.0