生淀粉结合域SBD及糖化酶基因在毕赤酵母中的融合表达

• 作者: 刘海余 廖思明 朱婧 朱绮霞 王青艳 申乃坤 秦艳 米慧芝 黄日波
• 来源期刊: 广西科学
• 学科: 工学
• 关键词: 黑曲霉ASP-S21 生淀粉糖化酶 淀粉结合域 In-fusion TM PCR Cloning 融合表达 毕赤酵母GS115
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 分子生物学
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: TS231|Q786
• 字数: 3395字
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究生淀粉结合域SBD及糖化酶基因在毕赤酵母中的融合表达,提高酶的表达量和水解生淀粉的能力.[方法]利用In-fusionTM PCR克隆技术将淀粉结合域SBD无缝隙插入到黑曲霉糖化酶基因glu的5′端构建融合表达质粒pPIC9K-psg,实现融合酶基因psg在毕赤酵母GS115中的高效表达,并进行酶学性质研究.[结果]融合酶的最适作用条件及热稳定性均与原始酶无明显差别,但反应温度及pH值的范围更为宽泛,在反应温度60～70℃,pH值为4.0～7.0时均较稳定;融合酶PSG降解生淀粉的能力较原始酶PG提高29.6％,比原始菌株提高86.5％.[结论]淀粉结合域SBD的融合提高了糖化酶水解生淀粉的能力.