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靶向PD-L1基因的CRISPR/Cas9基因敲除质粒的构建
靶向PD-L1基因的CRISPR/Cas9基因敲除质粒的构建
作者:
余祖江
孙冉冉
李娟
李晶晶
申申
阚全程
陈晓龙
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
PD-L1
肿瘤免疫
CRISPR/Cas9
基因敲除
摘要:
目的:构建靶向PD-L1基因的CRISPR/Cas9基因敲除质粒.方法:根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,设计并合成靶向PD-L1基因的5对sgRNA序列.为了进一步降低克隆背景和提高构建阳性率,在受体载体中引入毒性蛋白系统(Ccd).构建pX459-CcdB重组载体,将pX459-CcdB载体进行BbsⅠ酶切,将sgRNA插入到pX459-CcdB骨架载体中,转化到不含CcdA基因的宿主菌Stbl3中.酶切不完全引起的背景载体将因毒性蛋白的作用杀死宿主菌.转化后挑取阳性克隆,进行PCR和测序验证.结果与结论:经PCR和测序验证,重组质粒pX459-PD-L1-sgRNA构建成功,为下一步体内外敲除PD-L1基因和深入研究其在肿瘤免疫逃逸中的功能奠定了基础.
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基因敲除
CRISPR/Cas9
慢病毒
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篇名
靶向PD-L1基因的CRISPR/Cas9基因敲除质粒的构建
来源期刊
郑州大学学报(医学版)
学科
生物学
关键词
PD-L1
肿瘤免疫
CRISPR/Cas9
基因敲除
年,卷(期)
2016,(1)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
22-27
页数
6页
分类号
Q781
字数
3448字
语种
中文
DOI
10.13705/j.issn.1671-6825.2016.01.006
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
阚全程
郑州大学第一附属医院药学部
129
657
13.0
21.0
2
李娟
郑州大学第一附属医院感染科
102
348
9.0
13.0
3
余祖江
郑州大学第一附属医院感染科
170
476
10.0
13.0
4
李晶晶
郑州大学第一附属医院感染科
33
51
4.0
6.0
5
孙冉冉
郑州大学第一附属医院感染科
5
7
2.0
2.0
6
陈晓龙
郑州大学第一附属医院感染科
5
8
2.0
2.0
7
申申
郑州大学第一附属医院感染科
1
1
1.0
1.0
传播情况
被引次数趋势
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引文网络
引文网络
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2015(4)
参考文献(4)
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参考文献(0)
二级参考文献(0)
引证文献(1)
二级引证文献(0)
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引证文献(1)
二级引证文献(0)
2017(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
2018(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
研究主题发展历程
节点文献
PD-L1
肿瘤免疫
CRISPR/Cas9
基因敲除
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
郑州大学学报(医学版)
主办单位:
郑州大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1671-6825
CN:
41-1340/R
开本:
大16开
出版地:
郑州市大学路40号
邮发代号:
36-111
创刊时间:
1957
语种:
chi
出版文献量(篇)
8582
总下载数(次)
16
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