人舌鳞状细胞癌顺铂耐药细胞株CAL-27/DDP的建立及其生物学评价

• 作者: 姜慧 孙抒 张桐菲 张泽兵 徐召南 杨鹤 毕也 贾杰
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,鳞状细胞 舌肿瘤 顺铂 耐药性 MDR1 P糖蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 506-511,后插3
• 页数: 7页
• 分类号: R739.86
• 字数: 4693字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20160317

摘要

目的:建立人舌鳞状细胞癌(舌鳞癌)顺铂耐药细胞株CAL-27/DDP,探讨其顺铂耐药机制.方法:采用顺铂浓度梯度法对人舌鳞癌CAL-27细胞株进行诱导,将细胞分为CAL 27组和CAL-27/DDP组.CAL-27组细胞株用普通培养液培养,CAL-27/DDP组细胞株用含有不同浓度顺铂的培养液培养,经过12个月的诱导形成生长良好的耐药细胞系株CAL-27/DDP.采用倒置显微镜观察细胞株形态表现;MTT法检测细胞株的半数抑制浓度(IC50)和耐药指数(RI);流式细胞术检测细胞株的细胞周期;RT-PCR法检测细胞株中多药耐药基因(MDR1) mRNA的相对表达水平;Western blotting法检测细胞株P糖蛋白(P-gp)的相对表达水平.结果:CAL-27/DDP组细胞株在一段时间内能在普通培养液中稳定生长,并维持其形态和耐药性状.与CAL-27组细胞株比较,CAL-27/DDP细胞略增大,细胞中出现颗粒和“空泡”样变,胞浆丰富,倍增时间延长(P＜0.01),RI为18.09±0.30.与CAL-27组比较,CAL-27/DDP组G1期和G2期细胞比例减少,S期细胞比例升高,CAL-27/DDP组细胞株中MDR1 mRNA和P-gp相对表达水平升高(P＜0.01).结论:本研究建立了人舌鳞癌顺铂耐药细胞株CAL-27/DDP,其耐药机制与CAL-27/DDP细胞株中MDR1和P-gp的表达水平上调有关联.