SD大鼠维生素D受体真核过表达载体构建及功能分析

• 作者: 杨祎琦 程佳
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 维生素D 维生素D受体 超表达载体 CD513 癌细胞
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 108-112,151
• 页数: 6页
• 分类号: Q291
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2016.02.0020

摘要

[目的]构建SD大鼠维生素D受体真核过表达载体并将其在癌细胞中表达及分析不同癌细胞VDR表达的差异性.[方法]通过基因工程方法从pUC18-rat-VDR质粒载体上通过PCR扩增得到了大鼠VDR片段全长,并构建CD513-VDR-EGFP真核超表达载体;经常规PCR、XbaⅠ和BamH Ⅰ双酶切及测序鉴定后提取重组质粒CD513-VDR-EGFP并进行细胞转染.利用Western Blot和qPCR方法分析蛋白和基因表达差异.[结果]荧光显微镜下可见单独转染CD513-EGFP和单独转染CD513-VDR-EGFP的293T细胞和HeLa细胞表达强烈的绿色荧光蛋白,并检测到蛋白及基因表达差异性的存在.[结论]成功构建重组质粒CD513-VDR-EGFP并在目的细胞中过表达(P＜0.01),本底水平表达的VDR在HeLa细胞中的表达略高于293T细胞(P＞0.05).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程佳		2	0	0.0	0.0
2	杨祎琦		2	0	0.0	0.0