甘蓝型油菜BnFAD2基因的克隆、表达及功能分析

• 作者: 刘睿洋 刘芳 官春云
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 甘蓝型油菜 BnFAD2基因 生物信息学 蛋白活力 蛋白稳定性
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种?种质资源?分子遗传学
• 页码范围: 1000-1008
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2016.01000

摘要

高油酸油具备较高的营养价值,在甘蓝型油菜中,脂肪酸去饱和酶基因(FAD2)是控制油酸含量的关键基因。本研究克隆了甘蓝型油菜 A5、C5、A1连锁群上3个 BnFAD2基因的全长 cDNA 序列,分别命名为 BnFAD2-A5、BnFAD2-C5和BnFAD2-A1,各自编码384、384、136个氨基酸。分别使用TMHMM、Clust X软件分析FAD2基因的跨膜结构域和酶活中心表明, BnFAD2-A1不具备脱氢酶活性。采用酵母功能互补实验对4个基因(含已发表的BnFAD2-C1)进行功能验证,发现 BnFAD2-A5和 BnFAD2-C5基因去饱和能力接近,均大于 BnFAD2-C1基因。采用qRT-PCR 分析4个基因在甘蓝型油菜不同组织中的表达规律,并用血凝素标签法分析 BnFAD2-C1、BnFAD2-A5和BnFAD2-C5的蛋白稳定性,表明BnFAD2-A5和BnFAD2-C5是影响油菜种子油酸积累的主效基因。