酵母双杂交技术筛选杜氏盐藻cDNA文库中与S-腺苷高半胱氨酸水解酶相互作用的蛋白

• 作者: 关方霞 张彦婷 朱立强 李庆华 柴丹丹 薛乐勋
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: S-腺苷高半胱氨酸水解酶 酵母双杂交 蛋白相互作用 免疫共沉淀
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 3466字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13705/j.issn.1671-6825.2016.01.002

摘要

目的:应用酵母双杂交技术筛选杜氏盐藻cDNA文库中能与S-腺苷高半胱氨酸水解酶(dsSAHH)相互作用的蛋白.方法:将构建好的pGBKT7-dsSAHH诱饵载体转化至酵母细胞Y187,与转化有杜氏盐藻cDNA文库的酵母细胞AH109杂交,从杜氏盐藻cDNA文库中筛选出能与dsSAHH相互作用的蛋白质.扩增所得基因片段全长,并在原核内表达该融合蛋白.随后采用Far-western blot、His pull-down及免疫共沉淀方法验证dsSAHH与目的蛋白在体内、外的相互作用.结果:以dsSAHH为诱饵筛选出3个阳性克隆,扩增得到dsRACK1、dsMetAP1和dseEF1α3个新基因.His pull-down和免疫共沉淀体内外实验证实dsRACK1能与dsSAHH相互作用.结论:dsRACK1是dsSAHH的相互作用蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛乐勋	郑州大学生命科学学院	140	1187	18.0	26.0
2	关方霞	郑州大学生命科学学院	64	248	9.0	12.0
3	李庆华	郑州大学生命科学学院	20	74	6.0	7.0
4	朱立强	郑州大学第二附属医院检验科	11	39	3.0	6.0
5	张彦婷	郑州大学生命科学学院	17	42	4.0	5.0
6	柴丹丹	郑州大学生命科学学院	6	12	2.0	3.0