NFKBIA 3'UTR不同基因型载体的构建及其功能差异性比较

• 作者: 刘晓曼 周守宁 曾行 李嘉丽 杨朔 毕惠嫦 胡冰芳 黄民
• 来源期刊: 药学学报
• 学科: 医学
• 关键词: NFKBIA 3'非翻译区 单核苷酸多态性 荧光素酶报告基因载体 rs696 rs8904
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 药理学
• 页码范围: 80-85
• 页数: 6页
• 分类号: R966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16438/j.0513-4870.2015-0611

摘要

验证NFKBIA基因3'非翻译区(3'UTR)两个SNP--rs8904C＞T和rs696G＞A的功能.以两个位点分别为CC纯合子和GA杂合子基因型的人全基因组DNA为模板,通过设计不同引物以扩增长度为503 bp的NFKBIA基因3'UTR片段,经测序验证后将该片段克隆至荧光素酶载体pGL3-promoter中,构建4种重组质粒pGL3-rs8904C/rs696G、pGL3-rs8904C/rs696A、pGL3-rs8904T/rs696G和pGL3-rs8904T/rs696A,并转染LS 174T细胞,检测荧光素酶活性.与转染了pGL3-vector组(阴性对照)相比,转染重组双荧光素酶报告质粒的荧光素酶活性均显著下降(P＜0.001).对于rs696G＞A,含等位基因A的两种重组质粒pGL3-rs8904C/rs696A和pGL3-rs8904T/rs696A的荧光素酶活性分别比含等位基因G的两种重组质粒pGL3-rs8904C/rs696G和pGL3-rs8904T/rs696G下降约45.1％ (P＜0.05)和56.1％ (P＜0.001).对于rs8904C＞T,含等位基因T的两种重组质粒分别与含等位基因C的两种重组质粒相比,荧光素酶活性无显著性差异.NFKBIA基因3'UTR双荧光素酶报告基因载体构建成功,并发现rs696G＞A会减弱荧光素酶活性的表达,rs8904C＞T对荧光素酶活性的表达无明显影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄民		120	909	17.0	25.0
2	毕惠嫦		49	325	10.0	17.0
3	李嘉丽		20	64	4.0	7.0
4	曾行		3	6	1.0	2.0
5	杨朔		1	0	0.0	0.0
6	周守宁		3	3	1.0	1.0
7	刘晓曼		2	0	0.0	0.0
8	胡冰芳		4	1	1.0	1.0