火炬松SSR-PCR反应体系的建立及引物筛选

• 作者: 张蝶 徐刚标 邓亚婷 郭小丹
• 来源期刊: 广西林业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 火炬松 SSR-PCR 单因素试验 正交设计 引物筛选
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 253-258
• 页数: 6页
• 分类号: S791.255
• 字数: 2298字
• 语种: 中文

摘要

以火炬松(Pinus teada)幼嫩针叶为材料,采用单因素试验设计分析各组分对SSR-PCR扩增结果的影响,并进一步应用正交试验设计,从DNA模板、引物、dNTPs、Mg2和Taq酶5个因素3个水平对SSR扩增效果进行研究,确定火炬松SSR-PCR的最佳反应体系.结果表明:各因素不同水平浓度对SSR-PCR反应结果均有影响,火炬松SSR-PCR优化后的反应体系为:DNA模板80 ng、引物0.3μmol/L、dNTPs 0.20 mmol/L、Mg2+2.0 mmol/L、Taq酶1.00U、1×PCR Buffer,总体积25μL.运用该体系从60对引物中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SSR引物8对,并用不同火炬松家系进行了检验,证明该体系稳定可靠.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐刚标	中南林业科技大学林学院	75	755	14.0	24.0
2	郭小丹	中南林业科技大学林学院	4	9	2.0	3.0
3	张蝶	中南林业科技大学林学院	5	9	2.0	3.0
4	邓亚婷	中南林业科技大学林学院	2	2	1.0	1.0